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答案

PCR反應進行的條件：引物(PCR引物為DNA片段,，細胞內(nèi)DNA復制的引物為一段RNA鏈）,、酶、dNTP,、模板和緩沖液（其中需要Mg2+）,。

解析

引物有多種設計方法，由PCR在實驗中的目的決定,，但基本原則相同,。PCR所用的酶主要有兩種來源：Taq和Pfu，分別來自兩種不同的噬熱菌,。其中Taq擴增效率高但易發(fā)生錯配,。Pfu擴增效率弱但有糾錯功能。所以實際使用時根據(jù)需要必須做不同的選擇,。

知識點

PCR的特點：

1,、靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12）量級的起始待測模板擴增到微克（μg=-6）水平,。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位）,；在細菌學中最小檢出率為3個細菌,。

2、簡便,、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,，一般在2～4 小時完成擴增反應,。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素,，無放射性污染,、易推廣。

3,、純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,，DNA 粗制品及RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液,、體腔液,、洗嗽液、毛發(fā),、細胞,、活組織等DNA擴增檢測。